Методы определения
Для определения группы крови у человека используют метод агглютинации, при котором определяется набор антигенов (или агглютиногенов), которые расположены на поверхности эритроцитов.
Если в организм попали чужие антитела, наше тело начинает выработку специальных белков. На основе того, отсутствуют или присутствуют белки α и β, основана классификация групп АВ0 (основная система подразделения на группы крови у человека).
Метод агглютинации
Выяснить, какая группа крови подходит всем людям, можно по результату агглютинации (слипания эритроцитов). В сыворотку, содержащую белки α, β, α и β капают несколько капель крови. Проводится процедура переливания крови только в клинических условиях.
По результату реакции определяют то, к какой группе принадлежит кровь:
- если наблюдается отсутствие какой-либо реакции – 1 группа крови. Почти 50% жителей планеты являются ее носителями;
- в случае, когда реакция присутствует в сыворотке α и α+β – 2 группа крови. Около 40% людей имеют кровь такой группы;
- если же агглютинация произошла в сыворотке β и α+β – 3 группа крови. Примерно 8% жителей ее обладатели;
- реакция присутствует во всех трех пробирках – 4 группа крови. Только 2% людей имеют эту группу.
Система ABO и RH
Основная классификация крови – это система AB0, которая была открыта в начале 20 века. Определяются они наличием на поверхности эритроцитов специфических антигенов (агглютиногенов) A и B. Одна из их задач – подавать сигнал о присутствии чужеродных элементов, вызывая тем самым иммунную реакцию организма. Иммунная система никак не реагирует на свои антигены, но при появлении таких, которых в организме нет, она принимает их за врагов и начинает уничтожать. В организме вырабатываются антитела (иммуноглобулины) к чужим антигенам, в результате их реакции происходит склеивание эритроцитов.
Набор антигенов, находящихся на эритроцитах, определяет принадлежность к той или иной группе. На самом деле медикам известно около 400 антигенов, в связи с чем существует довольно много классификаций. Однако свойства большинства антигенов выражены слабо и не учитываются при переливании. Наибольшее внимание при гемотрансфузиях уделяют системам AB0 и Rh.
Согласно системе AB0, кровь делится на четыре группы. У первой нет ни того ни другого антигена, у второй – только A, у третьей – B, у четвертой есть оба антигена – A и B. В плазме присутствуют естественные антитела (агглютинины) – анти-A и анти-B (α и β). В крови могут находиться только разноименные антигены и антитела. Первая содержит анти-A и анти-B, вторая – анти-B (β), третья – анти-A (α), в плазме четвертой нет антител.
Наглядно это демонстрирует таблица.
Группа | Агглютиноген в красных клетках | Агглютинин в плазме |
I | отсутствует | анти-А и анти-В |
II | A | анти-В |
III | B | анти-А |
IV | AB | отсутствует |
По системе Rh, кровь может быть Rh-положительной или Rh-отрицательной. Это зависит от присутствия на поверхности красных клеток специфического антигена резус-фактора. Если кровь донора и пациента принадлежит к одной группе, но одна резус-положительная, другая резус-отрицательная, имеет место несовместимость.
Процесс определения принадлежности крови
Важным пунктом переливания является определение принадлежности биологической жидкости и наличия в ней инфекций. Для этого отбирают пробу крови для проведения общего анализа, делят полученное количество на две части и отправляют для исследования. В лаборатории первую проверят на наличие инфекций, количество гемоглобина и др. Вторую же используют для определения группы крови и ее резус-фактора.
Как происходит переливание крови пациенту?
Переливание крови происходит через вены, в редких, тяжелых случаях с помощью аппарата по переливанию крови осуществляют через артерию. Сейчас в медицине применяется и прямой метод переливания (сразу от донора – реципиенту) и метод с предварительным сбором. Т.е. переливают и кровь, которая некоторое время хранилась в банке доноров крови. Современная медицина переливает не просто кровь общей массой, а какой-то определенный, нужный реципиенту компонент:
- плазму,
- лейкоциты,
- тромбоциты,
- эритроциты,
- другие редкие компоненты крови.
Для осуществления переливания, донорская кровь проходит тщательный контроль со стороны медиков, для того чтобы исключить какие-либо опасные возбудители, вирусы или инфекции, а так же совместимость не только групп, но и резус-факторов, чтобы не вызвать конфликт в реципиенте.
какие есть показания к переливанию крови
Признаки несовместимости
Если пострадавшему влили неподходящий донорский биоматериал, это вызовет возникновение специфической симптоматики. Чаще бывают такие отклонения:
- Исследование: какую группу крови считать самой лучшей: положительные и негативные стороны
- Пациент становится беспокойным.
- Возникновение дискомфорта и резких болей в районе поясницы. Данный маркер свидетельствует, что в почках начали происходить изменения.
- Побледнение кожного покрова.
- Учащение дыхания, появление одышки.
- Повышение температуры тела или озноб от ощущения холода.
- Гипотония.
- Бактериально-токсический шок. Нарушение встречается редко, случается из-за занесения инфекции во время трансфузии.
У 5% проявляется такая симптоматика:
- Тошнота и рвота.
- Посинение.
- Возникновение сильных судорог.
- Непроизвольное мочеиспускание и дефекация.
В редчайших случаях существует вероятность возникновения гемолитического шока. При данном осложнении требуется немедленно спасать пациента.
Показания к переливанию крови у пациента
Гемотрансфузия применима тогда, когда нет возможности заменить другими методами лечения. Разумеется, сильная кровопотеря – абсолютное показание к переливанию. Обычно объем донорской крови составляет 500-3000 мл, в зависимости от потребностей реципиента. Так же возможна гемотрансфузия и при большей надобности крови, чем 3 литра.
Однако к процедуре переливания есть и ряд противопоказаний:
- дисфункция печени и почек,
- травмы, связанные с кровообращением мозга – кровоизлияния, сотрясения,
- аллергия,
- активная стадия туберкулеза,
- нарушение работы сердечно-сосудистой системы.
Теперь вы знаете, для чего предназначено переливание крови и какие показания к нему существуют.
Алгоритм проведения гемотрансфузии
Система АВО Основными антигенами системы АВО являются 2-А и В. В качестве отдельных специфичностей в ней выделяют еще 2антигена-А, В и А1. Отсутствие на эритроцитах указанных 4 антигенов обозночают О. Антитела анти-А и анти-В имеют естественное происхождение. Они обозначены греческими α иβ. Различают 4 группы крови, образуемые сочетаниями антигенов А и В с изогемагглютининами α иβ. На эритроцитах первой группы О (I), антигены А и В отсутствуют, в плазме содержатся антитела α иβ. Во вторй группе крови А (II) , на эритроцитах имеется антиген А, в плазме присутствуют антитела β. В третей группе В (III) содержатся антиген В и антитела α. В четвертой группе АВ (IV) присутствуют антигены АиВ, в сыворотке крови отсутствуют изоггемаглютинины α и β.
Резус Rh фактор
Резус фактор это антиген содержащийся в эритроцитах 85% людей, а также у обезьян Macaus rhesus. Кровь людей, эритроциты которых содержат Rh, называются положительной. Существует несколько различных антигенов системы Rh, в том числе группа Нr, составляющая с Rh общую систему. Rh-Hr Включающую в себя -3 разновидности Rh агглютиногена (С, Д, Е) -3разновидности Нr агглютиногена (с, д, е) и другие более редкие виды. Агглютиноген Нr содержится в эритроцитах 83% людей. Резус фактор передается по наследству как доминантный признак и не меняется в течение всей жизни. Переливание компонентов крови имеет право проводить: -Лечащий или дежурный врач. -Во время операции хирург или анестезиолог (не участвующий в операции или наркозе). -Врач отделения или кабинета гемотрансфузии. -Врач -трансфузиолог.
Определение группы крови по системе АВО (С применением цоликлонов) -2 капли (0, 1 мл) реагента и рядом по одной капле осадка эритроцитов (0, 02 — 0, 03 мл) -Сыворотку и эритроциты перемешивают стеклянной палочкой -Пластинку периодически покачивают, наблюдая за ходом реакции в течение 5 мин (позволяет выявить слабый агглютиноген А2) -производят интерпретацию результатов
Трудноопределимые группы крови
Подгруппы крови. Антиген А, содержащийся в эритроцитах группы А (II) и AB (IV), может быть представлен двумя вариантами (подгруппами) — А_1 и А_2. Антиген В таких различий не имеет. Неспецифическая агглютинация эритроцитов. О ней судят на основании способности эритроцитов агглютинироваться сыворотками всех групп, включая AB (IV). Неспецифическая агглютинация наблюдается при аутоиммунной гемолитической анемии и других аутоиммунных заболеваниях, сопровождающихся адсорбцией аутоантител на эритроцитах, при гемолитической болезни новорожденных, эритроциты которых нагружены аллоантителами матери.
Кровяные химеры. Кровяными химерами называют одновременное пребывание в кровяном русле двух популяций эритроцитов, отличающихся по группе крови и другим антигенам. Трансфузионные химеры возникают в результате многократного переливания эритроцитной массы или взвеси группы 0 (I) реципиентам другой группы. Истинные химеры встречаются у гетерозиготных близнецов, а также после пересадки аллогенного костного мозга. Другие особенности. Определение группы крови АВ0 и резус принадлежности может быть затруднено у больных в связи с изменением свойств эритроцитов при различных патологических состояниях (у больных циррозом печени, при ожогах, сепсисе). Определение резус -принадлежности
Наносят большую каплю (около 0, 1 мл) реагента на планшет. Наносят рядом маленькую каплю (0, 02-0, 03 мл) исследуемых эритроцитов. Тщательно смешивают реагент с эритроцитами стеклянной палочкой. Мягко покачивают пластинку. Результаты реакции учитывают через 3 мин после смешивания. При наличии агглютинации исследуемая кровь маркируется как резус положительная, при отсутствии — как резус отрицательная.
Проба на совместимость на плоскости при комнатной температуре
для проведения проб на индивидуальную совместимось используется кровь ( сыворотка) больного, взятая перед трансфузией или не более чем за 24 часа, при условии хранения при температуре +4+2°С.
На пластинку наносят 2 — 3 капли сыворотки реципиента и добавляют небольшое количество эритроцитов с таким расчетом, чтобы соотношение эритроцитов и сыворотки было 1: 10 Далее эритроциты перемешивают с сывороткой, пластинку слегка покачивают в течение 5 мин. Проба на совместимость с применением 33%полиглюкина
В пробирку вносят 2 капли (0, 1 мл) сыворотки реципиента 1 каплю (0, 05) мл эритроцитов донора и добавляют 1 каплю (0, 1 мл) 33% полиглюкина.
Пробирку наклоняют до горизонтального положения, слегка потряхивая, затем медленно вращают таким образом, чтобы содержимое ее растеклось по стенкам тонким слоем. Контакт эритроцитов с сывороткой больного при вращении пробирки следует продолжать не менее 3 мин.
Через 3 — 5 мин в пробирку добавляют 2 — 3 мл физиологического раствора и перемешивают содержимое путем 2 — 3-х кратного перевертывания пробирки, не взбалтывая.
Результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооруженным глазом или через лупу. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о том, что кровь реципиента и донора несовместимы, отсутствие агглютинации является показателем совместимости крови донора и реципиента.
Технические ошибки
Ошибочный порядок расположения реагентов. Температурные условия (определение группы крови производят при температуре не ниже 15°Си не выше 25°С) Соотношение реагентов и исследуемых эритроцитов. Продолжительность наблюдения. (позволяет выявить слабый агглютиноген А_2, характеризующийся замедленной агглютинацией)
Биологическая проба
Биологическую пробу проводят независимо от объема гемотрансфузионной среды и скорости ее введения.
При необходимости переливания нескольких доз компонентов крови биологическую пробу проводят перед началом переливания каждой новой дозы. Техника проведения биологической пробы: однократно переливается 10 мл гемотрансфузионной среды со скоростью 2 — 3 мл (40 — 60 капель) в мин
в течение 3 мин наблюдают за реципиентом, контролируя у него пульс, дыхание, артериальное давление, общее состояние, цвет кожи, измеряют температуру тела
такую процедуру повторяют еще дважды. Появление в этот период даже одного из таких клинических симптомов, как озноб, боли в пояснице, чувство жара и стеснения в груди, головной боли, тошноты или рвоты, требует немедленного прекращения трансфузии и отказа от переливания данной трансфузионной среды.
Экстренность трансфузии компонентов крови не освобождает от выполнения биологической пробы!!!
Врач, проводящий переливание компонентов крови обязан:
1.Определить показания для проведения гемотрансфузионной терапии с учетом противопоказаний.
2. Получить информированное добровольное согласие реципиента или его законного представителя на проведение гемотрансфузионной терапии по установленной форме.
3. Провести первичное определение групповой принадлежности крови больного по системе АВО.
КАТЕГОРИЧЕСКИ ЗАПРЕЩАЕТСЯ ИСПОЛЬЗОВАТЬ ДАННЫЕ О ГРУППОВОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ ПО СИСТЕМАМ АВО И РЕЗУС ИЗ ПАСПОРТА, ПРЕДШЕДСТВУЮЩЕЙ ИСТОРИИ БОЛЕЗНИ И ДРУГИХ ДОКУМЕНТОВ.
4. Внести в направление в клинико-диагностическую лабораторию (форма № 207/у), сведения о результате определения группы крови по системе АВО, серии диагностикумов, трансфузионный и акушерско-гинекологический анамнез. Подписать направление
5. Ознакомиться с заключением клинико-диагностической лаборатории. Перенести данные о групповой и резус-принадлежности больного на лицевую часть медицинской карты стационарного больного с указанием даты анализа и своей фамилии.
6. Оформить предтрансфузионный эпикриз.
7. Провести макроскопическую оценку лабораторного желатина и диагностикумов.
8. Провести макроскопическую оценку каждой дозы гемотрансфузионной среды.
9. Повторно непосредственно перед трансфузией определить группу крови реципиента по системе АВО
10. Определить группу крови по системе АВО с эритроцитсодержащей средой.
11. Проконтролировать соответствие паспортных данных.
12. Провести пробу на совместимость крови реципиента и крови донора (гемотрансфузионной среды) по системам АВО и резус.
13. Зафиксировать результат изосерологических исследований в протоколе операции переливания крови.
ПРОБЫ НА ИНДИВИДУАЛЬНУЮ СОВМЕСТИМОСТЬ ПО СИСТЕМЕ АВО И РЕЗУС НЕ ЗАМЕНЯЮТ ДРУГ ДРУГА.
ПРОВОДЯТСЯ ВО ВСЕХ СЛУЧАЯХ С ОБРАЗЦАМИ КРОВИ ИЗ КАЖДОГО КОНТЕЙНЕРА.
ОБЯЗАТЕЛЬНЫ, ДАЖЕ ЕСЛИ ЭРИТРОЦИТНАЯ МАССА ИЛИ ВЗВЕСЬ ПОДОБРАНЫ РЕЦИПИЕНТУ ИНДИВИДУАЛЬНО В СПЕЦИАЛИЗИРОВАННОЙ ЛАБОРАТОРИИ.
14. Провести биологическую пробу. Зафиксировать её результат в протоколе операции переливания крови.
15. Контролировать состояние реципиента, темп введения трансфузионной среды.
16. При изменении состояния больного в первую очередь исключить посттрансфузионное осложнение.
17. Оценить показатели артериального давления, пульса, результаты термометрии.
18. Зарегистрировать гемотрансфузию:
•в дневнике наблюдений медицинской карты стационарного больного;
•в журнале регистрации переливаний крови и её компонентов (форма № 009/у) ;
•заполнить протокол гемотрансфузии
19. Провести макрооценку первой порции мочи.
20. Назначить клинические анализы крови и мочи на следующие сутки после гемотрансфузии.
21. Провести оценку суточного диуреза, водного баланса, результатов анализов мочи и крови.
22. Наблюдать за больным с отражением результатов наблюдения в дневнике истории болезни. При изменении клинической симптоматики и лабораторных показателей до выписки больного из стационара в первую очередь исключить посттрансфузионное осложнение.
Осложнения -Иммунные осложнения ( острый гемолиз, гипертермическая негемолитическая реакция, анафилактический шок, некардиогенный отек легких)
-Неиммунные осложнения (острый гемолиз, бактериальный шок, ОССН, отек легких)
-Непосредственные осложнения (аллоиммунизация антигенами эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов или плазменными белками, гемолиз, реакция <<�трансплантат против хозяина>>, посттрансфузионная пурпура)
Отдаленные осложнения
-Иммунные ( гемолиз, Реакция «трансплантат против хозяина», Посттрансфузионная пурпура, Аллоиммунизация антигенами эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов или плазменными белками
Литература:
А. Г. Румянцев, В. А. Аграненко. Клиническая трансфузиология-М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1997.
Е. Б. Жибурт. Трансфузиология-С.: ПИТЕР, 2002.
Правила и аудит переливания крови. Руководство для врачей. -М. , РАЕН, 2010.
Рагимов А. А. Трансфузиология. Национальное руководство-М.: ГЭОТАР Медиа, 2012.
С. И. Донсков, В. А. Мороков. Группы крови человека: Руководство по иммуносерологии-М.: ИП Скороходов В. А. , 2013.
Жибурт Е. Б. Менеджмент крови пациента//Здравоохранение. -2014.
Алгоритмы исследования антигенов эритроцитов и антиэритроцитарных антител в сложнодиагностируемых случаях. Методические рекомендации N 99/181 (утв. Минздравом России 17. 05. 2000)
Приказ Минздрава России от 25. 11. 2002 N363 » Об утверждении Инструкции по применению компонентов крови»
Приказ Минздрава России от 02. 04. 2013 N183н » Об утверждении правил клинического использования донорской крови и (или) ее компонентов»
История возникновения 4-й группы
Мнение ученых по поводу сравнительно недавнего появления (не ранее XI века нашей эры) 4-й ГК разделились. Но выделяют три основных теории:
- Мутация 2-й и 3-й группы в 4-ю в результате смешения рас: индоевропейской и монголоидной, которые характеризовались индивидуальными особенностями, появившимися при длительном эволюционном процессе. Подобное смешение началось недавно, что и объясняет молодость четвертой группы.
Смешанный брак индоевропейской и монголоидной рассы
- Другая версия: появление 4-й группы связано с противостоянием человечества вирусам, которые угрожали полным уничтожением земного населения. Ответом на такие атаки и стала выработка соответствующих антител, объединяющих А и В.
- Согласно третьей теории молодая четвертая группа сформировалась в качестве защиты организма в процессе эволюции культуры приема пищи. По мере усложнения способов обработки продуктов питания возникла необходимость в совмещении антигенов А и В, которые должны оберегать организм от неестественных для него пищевых пристрастий.
Разногласия по поводу истинности теории происхождения 4-й группы до сих пор имеют место в научной среде. Но по поводу редкости этой крови царит единство.
Интересно! Носители разных ГК имеют характерные для них агломерации. Первая и вторая группы присущи жителям Африки и Европы, а третья – Азии и Сибири. 4-я ГК свойственна обитателям юго-восточной Азии, Японии и Австралии. Обнаружили следы АВ (IV) на Туринской плащанице.