Определение величины интраоперационной кровопотери при эндовидеохирургических вмешательствах в урологии

Гликированный гемоглобин (A1c) – специфическое соединение гемоглобина эритроцитов с глюкозой, концентрация которого отражает среднее содержание глюкозы в крови за период около трех месяцев.

Синонимы русские

Гликогемоглобин, гемоглобин A1c, HbA1c, гликозилированный гемоглобин.

Синонимы английские

Glycated hemoglobin,hemoglobin A1c, HbA1c, glycohemoglobin, glycosylated hemoglobin.

Метод исследования

Ионообменная высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ).

Единицы измерения

% (процент).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Анализ на гликированный гемоглобин (A1c) помогает оценить среднее содержание глюкозы в крови за последние 2-3 месяца.

Гемоглобин – это находящийся внутри красных кровяных клеток (эритроцитов) белок, переносящий кислород. Существует несколько типов нормального гемоглобина, кроме того, идентифицировано много аномальных разновидностей, хотя преобладающая форма – это гемоглобин А, составляющий 95-98 % от общего гемоглобина. Гемоглобин А подразделяется на несколько компонентов, один из которых А1с. Часть циркулирующей в крови глюкозы спонтанно связывается с гемоглобином, образуя так называемый гликированный гемоглобин. Чем выше концентрация глюкозы в крови, тем больше образуется гликированного гемоглобина. Соединившись с гемоглобином, глюкоза остается «в связке» с ним до самого конца жизни эритроцита, то есть 120 дней. Соединение глюкозы с гемоглобином А называется HbA1c или A1c. Гликированный гемоглобин образуется в крови и исчезает из нее ежедневно, поскольку старые эритроциты погибают, а молодые (еще не гликированные) занимают их место.

Тест на гемоглобин A1c применяется для контроля за состоянием пациентов, которым поставлен диагноз «сахарный диабет». Он помогает оценить, насколько эффективно идет регулирование уровня глюкозы в процессе лечения.

Некоторым пациентам анализ на гемоглобин A1c назначают для диагностики диабета и преддиабетического состояния дополнительно к тесту на глюкозу в плазме крови натощак и тесту на толерантность к глюкозе.

Полученный показатель измеряется в процентах. Пациентам, страдающим диабетом, необходимо стремиться удерживать уровень гликированного гемоглобина не выше 7 %.

A1c следует указывать одним из трех способов:

• в процентах от общего количества гемоглобина,
• в ммоль/моль, согласно Международной федерации клинической химии и лабораторной медицины,
• как среднее содержание глюкозы мг/дл или ммоль/л.

Для чего используется исследование?

• Для контроля за глюкозой у больных сахарным диабетом – для них поддержание ее уровня в крови как можно ближе к норме очень важно. Это помогает минимизировать осложнения на почки, глаза, сердечно-сосудистую и нервную системы.
• Чтобы определить среднее содержание глюкозы в крови пациента за несколько последних месяцев.
• Чтобы подтвердить правильность принятых для лечения диабета мер и выяснить, не требуют ли они корректировок.
• Для определения у пациентов с недавно диагностированным сахарным диабетом неконтролируемых подъемов глюкозы в крови. Причем тест может назначаться несколько раз до тех пор, пока не будет выявлен желаемый уровень глюкозы, затем его требуется повторять несколько раз в год, чтобы убедиться, что нормальный уровень сохраняется.
• В профилактических целях, чтобы диагностировать сахарный диабет на ранней стадии.

Когда назначается исследование?

В зависимости от типа диабета и от того, насколько хорошо болезнь поддается лечению, тест на А1с проводится от 2 до 4 раз в год. В среднем пациентам с сахарным диабетом рекомендуется сдавать анализ на А1с дважды в год. Если диабет у пациента диагностирован впервые или контрольное измерение прошло неудачно, анализ назначается повторно.

К тому же данный анализ назначается, если у пациента подозревается диабет, поскольку есть симптомы повышенного содержания глюкозы в крови:

• сильная жажда,
• частое обильное мочеиспускание,
• быстрая утомляемость,
• ухудшение зрения,
• повышенная восприимчивость к инфекциям.

Что означают результаты?

Референсные значения: 4,27 — 6,07 %.

Чем ближе уровень А1с к 7 % у пациента, страдающего диабетом, тем легче контролировать болезнь. Соответственно, с повышением уровня гликированного гемоглобина повышается и риск осложнений.

Результаты анализа на А1с интерпретируются следующим образом.

Согласно клиническим рекомендациям МЗ РФ ОО «Российской ассоциации эндокринологов» «Алгоритмы специализированной медицинской помощи больным сахарным диабетом» (2019 г.), дополнительным диагностическим показателем принят среднесуточный уровень глюкозы плазмы (ССГП) за последние три месяца и его корреляция с уровнем HbA1c.

Что может влиять на результат?

У пациентов с аномальными формами гемоглобина, например у больных с серповидными эритроцитами, уровень гликированного гемоглобина будет занижен. Кроме того, если человек страдает анемией, сильными кровотечениями, результаты анализа у него тоже могут быть заниженными. Напротив, завышенными показатели А1с бывают при недостатке железа и при недавно перенесенном переливании крови (так как жидкие консерванты крови содержат высокую концентрацию глюкозы).

Определение гемоглобинапрезентация к уроку

Слайд 1

Методы определения концентрации гемоглобина

Слайд 2

Оценка содержания гемоглобина: клиническое значение: ↓ Снижение концентрации гемоглобина: анемии (нарушение синтеза Hb , кровопотеря, гемолиз, недостаток выработки эритроцитов и т.п.)

Слайд 3

­ ↑ Повышение концентрации гемоглобина: полицитемия, гемоконцентрация при дегитратации, ожогах, упорной рвоте; пребывание на больших высотах, чрезмерная физическая нагрузка или возбуждение;

Слайд 4

­ заболевания легких, приводящие к снижению легочной перфузии, плохой аэрации легких; хроническое химическое воздействие нитритов, сульфонамидов, вызывающих образование мет- и сульфогемоглобина. ­ ↑ Повышение концентрации гемоглобина:

Слайд 5

Термин « общий гемоглобин » распространяется на совокупность форм гемоглобина , которые присутствуют в крови у здоровых людей или же появляются при патологии:

Слайд 6

окси гемоглобин ( HbO 2 ) ; восстановленный гемоглобин ( Hb) (синонимы: гемоглобин (Н Hb ++ ), феррогемоглобин ( Hb 4 ) ); карбо гемоглобин ( HbCO 2 ) (СО 2 – углекислый газ) Нормальные формы гемоглобина

Слайд 7

карбо кси гемоглобин ( HbCO) (син.: карбонмоноксигемоглобин ( HbCO) 4 ; мет гемоглобин ( MetHb), синонимы: гемИ глобин (Hb +++ ), ферригемоглобин ( Hb 4 +3 ); сульф гемоглобин ( SHb), синоним – вердоглобин S; гемИглобинцианид ( HiCN) (син.: цианметгемоглобин ( CNMetHb) ) ; и др. Патологические формы гемоглобина

Слайд 8

МЕТОДЫ АНАЛИЗА Больше всего в крови представлены: оксигемоглобин, дезоксигемоглобин, карбоксигемоглобин, метгемоглобин. Спектры поглощения оксигемоглобина (HbO 2 ), дезоксигемоглобина (Hb Н ) метгемоглобина (HbMet), карбоксигемоглобина (HbCO)

Слайд 9

Для определения гемоглобина чаще всего анализируют производные гемоглобина , образовавшиеся в процессе его окисления и присоединения к гему различных химических групп, приводящих к изменению валентности железа и окраски раствора .

Слайд 10

При количественном определении гемоглобина колориметрическими методами возникает проблема в выборе реагента , который превращал бы все производные гемоглобина только в одну форму перед фотометрическим анализом.

Слайд 11

Лучшими методами, количественно превращающими гемоглобин в его производные, оказались: гемиглобинцианидный (HbCN), гемихромный (HbChr) и гемиглобиназидный (HbN3), которые при фотометрировании дают наименьшую ошибку определения среди других методов анализа.

Слайд 12

ГемИглобинцианидный метод (метод Драбкина) (1936) Спектр поглощения цианметгемоглобина ( CNmetHb ) Принцип метода : все формы гемоглобина преобразуются в гемиглобинцианид (с помощью трансформирующего реагента (содержащего железосинеродистый калий, цианид калия и гидрокарбонат натрия) при длине волны 540 нм

Слайд 13

ГемИглобинцианидный метод (метод Драбкина) (1932) А 540 HiCN x 16114,5 x 10 -3 x P Hb (г/л)=  =367,7 x А 540 HiCN 11,0 х L А 540 HiCN — абсорбция раствора гемоглобина при длине волны 540 нм, 16114,5 — молекулярная масса мономера гемоглобина, 11,0 — коэффициент миллимолярной экстинкции цианметгемоглобина, L — длина оптического пути, равная в большинстве фотометров 10 мм, 10 -3 — перевод молярной массы гемоглобина в миллимолярную массу Р – разведение крови (1 : 251, соотношение 20 мкл крови и 5,0 мл трансформирующего раствора)

Слайд 14

Перевод гемоглобина в гемиглобинцианид осуществляется при его взаимодействии с трансформирующим раствором , содержащим феррицианид калия, цианид калия, дигидрофосфат калия и неионный детергент: Детергент усиливает гемолиз эритроцитов и предотвращает мутность, связанную с белками плазмы. Дигидрофосфат калия поддерживает уровень рН, при котором реакция проходит за 3-5 минут.

Слайд 15

Феррицианид калия окисляет все формы гемоглобина в метгемоглобин , который образует с цианистым калием гемИглобинцианид, имеющий красноватый цвет, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна концентрации гемоглобина в пробе. Окси гемоглобин Дезокси гемоглобин Карбокси гемоглобин Мет гемоглобин

Слайд 16

Характеристика метода Гемиглобинцианидный метод, разработанный в 1936 г. Драбкиным, был одобрен Международным Комитетом по стандартизации в гематологии (ICSH) в 1963 г. Основным достоинством гемиглобинцианидного метода является то, что HbCN (гемИглобинцианид) является стабильным производным гемоглобина, и все имеющиеся в крови формы гемоглобина могут быть быстро и количественно превращены в HbCN; Метод обеспечивает возможность получения результатов с погрешностью, НЕ превышающей ± 2%.

Слайд 17

Требования безопасности при работе с раствором, содержащим цианистые соединения При всех положительных параметрах гемиглобинцианидного метода большим его недостатком является то, что он основан на применении ядовитых цианистых соединений ;

Слайд 18

Вместо цианистого калия многие применяют маскированный цианид — ацетонциангидрин , который в процессе приготовления трансформирующего раствора распадается с образованием цианид-иона. Характер действия ацетонциангидрина на человека сходен с действием синильной кислоты , но эффект развивается медленнее . Ацетонциангидрин всасывается через кожу и может вызывать тяжелые отравления . Его предельно-допустимая концентрация (ПДК) составляет 0,9 мг/м 3 , класс опасности 2.

Слайд 20

Оптическая схема

Слайд 21

Зависимость показаний гемоглобинометра “ МиниГем-540” от времени инкубации образцов крови с трансформирующим раствором Из графика видно, что лишь на 15 минуте от начала реакции лизиса показания прибора начинают стабилизироваться и далее уже не меняются в течение последующих 2 часов . Поэтому, измерение гемоглобина следует проводить не ранее, чем через 20 минут после внесения крови в пробирку с трансформирующим раствором, когда весь имеющийся в пробирке гемоглобин преобразуется в конечный продукт реакции — цианметгемоглобин.

Слайд 22

Гемихромный метод Принцип гемихромного метода основан на переводе всех форм гемоглобина в одну — гемихром . Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации гемоглобина в пробе. Гемоглобин Геми-хром Трансформир. р-р: Жирные кислоты + Феррицианид К (или додецилсульфат Na)

Слайд 23

Гемихромный метод Спектр поглощения метгемоглобина ( HbMet ) Максимум кривой поглощения гемихрома находится на длине волны 533 нм . Ближайшая к 533 нм типовая длина волны – 540 нм, на которой и проводится фотометрирование с учетом коэффициента пересчета (фактора) для 540 нм .

Слайд 24

Основным достоинством гемихромного метода является то, что содержащиеся в крови Формы гемоглобина могут быть быстро и количественно превращены в HbChr при полной безвредности трансформирующего раствора

Слайд 25

Оптическая схема

MCHC (Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration) – средняя концентрация гемоглобина в эритроците

Просчет параметра

МСНС отражает концентрацию гемоглобина в «среднем» эритроците (отношение содержания гемоглобина к объему клетки) и характеризует степень насыщения эритроцита гемоглобином в процентах. Этот параметр можно рассчитать при помощи показателей гемоглобина и гематокрита:

МСНС = Нb (г/дл)·100/Нt (%).

Генетически детерминированный показатель

Среднее содержание гемоглобина в эритроците является самым стабильным, генетически детерминированным показателем и для взрослых не зависит от возраста, пола, расы. Коэффициент вариации этого параметра у пациентов в клинике составляет 4–5%.

Из всех эритроцитарных индексов МСНС меньше всего подвержен колебаниям при патологических состояниях. Поэтому его снижение имеет большую ценность в диагностике:

• железодефицитной анемии,
• талассемии,
• свинцовой интоксикации,
• некоторых гемоглобинопатий.

Индикатор ошибки

По этой же причине параметр можно использовать как индикатор ошибки прибора или неточности, допущенной при подготовке пробы к исследованию. Стабильность калибровок, правильное функционирование оборудования – все это полезно контролировать по текущему среднему значению МСНС. Оно должно колебаться в пределах 34±2 ед.

Клинико-диагностическое значение